猪精子冻后质量低是制约其应用的首要问题,公猪精子的耐冻能力存在较大的个体差异,而精子脂肪酸组成是影响耐冻性的关键因素之一。中心遗传育种与繁殖研究院团队依托国家重点研发计划课题(2021YFD1200303),对荣昌猪精子的耐冻能力与其脂肪酸组成的关系进行探索。
研究团队通过相对活力法和线性运动活力-质膜完整性聚类分析法从14头荣昌公猪中筛选出具有高耐冻性精子的荣昌猪5头、具有低耐冻性精子的荣昌猪5头。
图1 不同荣昌公猪精子耐冻能力比较
采用靶向脂质组学分析,从高、低耐冻性精子中解析出11种显著差异脂肪酸,选择对精子质量影响较大的棕榈酸和十五烷酸作为外源添加物,研究其对荣昌猪精子的冷冻保存效果。研究结果表明,在精液冷冻稀释液中添加200umol/L的棕榈酸的试验组中,精液解冻后的活率由30.56%提高到47.25%,质膜完整性达46.28%,顶体完整性达40%,线粒体膜电位达52.06%,黄金地鼠卵母细胞穿卵率由25.51%提高到38.79%。棕榈酸对荣昌猪精液冷冻保存的改善效果优于十五烷酸。
图2 荣昌猪精子脂肪酸分类占比柱状图
本研究探索了不同耐冻性荣昌猪精子的脂肪酸组成,筛选了精子耐冻性标志物,为研究猪精子冷冻损伤的生物学机制提供新视角,同时形成了一种新型精子基础冷冻稀释液,为开发高效、安全的猪精液冷冻保护剂提供有力的参考。