为猪轮状病毒(PoRV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)是引起生猪腹泻的重要病原,在猪场中广泛流行,严重危害养猪业。两者导致的腹泻临床症状非常相似,且经常出现混合感染,给现场诊断带来困难,容易造成误判或漏检。为此,国家生猪技术创新中心疫病防控研究院创新团队基于荧光重组酶介导的等温扩增(RAA)检测方法,建立了一种同时检测PoRV和PEDV核酸的现场快速检测技术。在42℃恒温条件下,该技术仅需20分钟即可完成检测。
通过与已公布的PoRV和PEDV的代表毒株进行多序列比对,团队筛选到PoRV的NSP4基因和PEDV的M基因中的特异性保守基序作为检测靶标,不仅检测速度得到大幅提升,PoRV和PEDV的检测限均达到10 copies/μL,而且与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)等其他常见猪腹泻病原体无交叉反应。应用该方法检测猪腹泻临床样品,与国家标准方法相比,阳性样本符合率达100%,检测灵敏度高、特异性强、检测时间更短。这项技术能现场快速精准判断猪腹泻病因,帮助养殖户及时防控,减少生猪死亡,降低经济损失,有效遏制动物疫病传播,保障猪肉产能和食品安全,为生猪产业稳定发展提供了技术支撑。
本研究成功建立了PoRV和PEDV的实时双重荧光RAA检测技术,该方法便捷、快速且灵敏,适用于PoRV、PEDV及其混合感染的临床样品检测,具有良好的应用前景,相关论文《PoRV和PEDV双重荧光RAA检测方法的建立与初步应用》已发表于《中国兽医学报》。
本研究受国家生猪技术创新中心先导科技项目(NCTIP-XD/B19)、国家动物疫病长期性观测监测项目(ZX06S2302)和重庆地区猪腹泻冠状病毒遗传演化及生物学特性研究(25509C)资助。












